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No.15 谱图再现性的获取
当测试结果没有再现性时，该怎么办？
1.流动相混合方式的差异
在进行流动相混合时，如果是在线混合，有可能会因为泵的精密度不够，造成无法获得稳定再现性。特别是当使用低流量时，更有可能会因为泵精密度偏低造成再现性问题。如果是等度分析，可改为预先混合使分离得到改善。需要进行在线混合时，预先确认送液泵的日间差与系统间差异，可以预防问题的产生。
| Column | YMC-Triart C18 (3 μm, 12 nm) 50 X 2.0 mmI.D. |
|---|---|
| Flow rate | 0.2 mL/min |
| Temperature | 40℃ |
| Detection | UV at 260 nm |
2.流动相组成的变化
当流动相中的有机溶剂占比很少时，可能会因有机溶剂的挥发造成流动相配比发生改变，进而造成保留时间无再现性。虽然推荐流动相现用现配，但有时也会存在流动相需要放置一段时间再用的状况。如遇这种状况，流动相需封存在密闭溶剂瓶中并贴好封条以防止挥发。
| Column |
YMC-Pack ODS-A (5 μm,30 nm) 100 X4.6 mmI.D. |
|---|---|
| Eluent |
phosphate buffer containing 1-decansulfonic acid sodium salt /acetonitrile (1000/40) |
| Flow rate | 1.4 mL/min |
| Temperature | 20℃ |
| Detection | UV at 254 nm |
3.流动相配制方法的影响
按流动相体积比进行配制时，使用量筒体积比混合与使用容量瓶定容方式不同，可能会造成保留时间的差异。
Eluent : リン酸緩衝液 (pH 5.2)／アセトニトリル (90/10)
(1)1L容量瓶内倒入900mL缓冲盐后，在加乙腈定容至1L（实际添加乙腈量为112.5mL）
(2)用量筒分别量取900mL缓冲盐与100mL乙腈后混溶。
水溶性维生素的分析
- Thiamine HCl (Vitamin B1)
- Pyridoxine HCl (Vitamin B6)
- Nicotinamide
- Cyanocobalamin (Vitamin B12)
- L-Ascorbic acid 2-glucoside
- L-Ascorbic acid (Vitamin C)
- Erythorbic acid
- Riboflavin (Vitamin B2)
- Nicotinic acid
| Column | YMC-Triart C18 (1.9 μm, 12 nm) 100 X 2.0 mmI.D. |
|---|---|
| Flow rate | 0.15 mL/min |
| Temperature | 40℃ |
| Detection | UV at 260 nm |
| Injection | 2 μL |