技术信息
色谱柱填充完成后,建议在使用前采用标准样品测定理论塔板数 N(或理论塔板高度 HETP)和不对称因子 As。定期重复该标准测试,可以有效确认填料的质量和耐久性。比较测试结果时,请使用相同条件和相同测量设备。除死体积差异外,流速、温度、洗脱液和样品进样量等因素也会影响结果。
理论塔板数可通过以下公式计算。数值越大,表示填料填充越致密。在相同保留时间下,峰宽越窄,理论塔板数越高。通常色谱柱越长、填料粒径越小,理论塔板数越大。评价色谱柱性能时,通常以每米理论塔板数作为指标。
N = 5.54 x (tR / W0.5h)2
N/m = N / L L = 充填ベッド長(m)
除理论塔板数外,也可以使用理论塔板高度作为色谱柱性能指标,可通过以下公式计算。数值越小,表示填料填充越致密。
HETP = L / N
洗脱峰形状也是评价色谱柱性能的重要因素。较为简单的评价方法是不对称因子,可通过以下公式计算。数值越接近 1,表示峰形越左右对称、越理想。
As = b / a
