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技术支持

No.11 鬼峰形成的原因

在进行梯度洗脱过程中,有时即使进空白也会出现无数小峰(见图(A))。将色谱柱取下进行同样的操作时,则无鬼峰(见图(B))。据此,很多人会认为这是由色谱柱引起的。实际上无论怎样清洗色谱柱或更换其它色谱柱,效果似乎都没有得到改善。因此,有必要考虑是否是因为色谱柱以外的原因引起的。根据经验,造成鬼峰的原因之一是流动相的水源问题。比如使用的水纯度级别不够或受污染的水。

在进行等度洗脱时没有问题,但进行梯度洗脱时却有可能会显现出问题。这是因为梯度洗脱时,由于初始时有机溶剂比例低,此时流动相中的杂质可能会被吸附积聚在色谱柱上,随梯度中有机溶剂比例的升高,积聚的杂质逐渐被洗脱出来,从而表现为鬼峰。由于此鬼峰的大小与流动相中杂质富集程度有关,故可利用此特点排查鬼峰是否来源于水相。

综上,进行梯度洗脱时,尤其需要注意溶剂的级别和管理。

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